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ODS填料的特點你知道嗎?

更新時間:2023-01-25瀏覽:614次

  ODS填料是分析工作中使用zui多,應用zui廣的液相色譜柱,占據了液相色譜柱的半壁江山。正如世界上沒有兩片*相同的樹葉,也沒有兩款一模一樣的 C18 柱,如何在市場上繁雜的 C18 柱中尋找到適合自己分析的那款,是大家非常關心的話題。
  正相柱大多以硅膠為柱,或是在硅膠表面鍵合-CN,-NH3等官能團的鍵合相硅膠柱;反相柱填料主要以硅膠為基質,在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團(ODS)稱為ODS填料柱,其它常用的反相柱還C8,C4,C2和苯基柱等。
  ODS填料特點:
  1、適合用有機溶劑分離嗜脂性分子,可以非常經濟地大規模制備各種天然產物
  2、結合凝膠過濾、分配色譜及吸附性層析于一身,分離結構非常相近的分子
  3、載量可高達300mg樣品/ml凝膠,極少需要再生,分離效果可保持十幾年不變。
  作為凝膠柱層析中的關鍵一環,選擇合適的填料是關重要的,下面我們來了解下。
  1.當目標蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚時,可用PAGE電泳方法或層析方法加以測定。分離范圍廣闊的Superose HR預裝柱很適合測定未知蛋白的分子量。用少量離子交換介質在多個含不同PH緩沖液的試管中,可簡易地測出PI,并選擇純化用緩沖液的佳PH。
  2.若對目標蛋白的特性或樣品成分不太了解,可嘗試幾種不同的純化方法:
  (1)使用通用的凝膠過濾方法,選擇分離范圍廣闊的介質如Superose、Sephacryl HR依據分子量將 樣品分成不同組份。
  (2)用含專一配體或抗體的親和層析介質結合目標蛋白。亦可用各種活化偶聯介質偶聯目標蛋白的底物、受體等自制親和介質,再用以結合目標蛋白。一步即可得到高純度樣品。
  (3)體積大的樣品,往往使用離子交換層析加以濃縮及粗純化。高鹽洗脫的樣品,可再用疏水層析純化。疏水層析利用高鹽吸附、低鹽洗脫的原理,洗脫樣品又可直接上離子交換等吸附性層析。兩種方法常被交替使用于純化流程中。

 

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